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蘭伯艾克斯|二氧化碳培養(yǎng)箱:細胞培養(yǎng)小科普

更新時間:2023-07-17點擊次數(shù):711


二氧化碳培養(yǎng)箱:細胞培養(yǎng)小科普


圖片


大家有沒有試過,把培養(yǎng)基凍起來,顏色會有變化嗎?顏色一開始變黃!解凍以后,又會慢慢變紅!為什么呢?


1

如果凍的液體是水,或是緩沖液,顏色會有變化嗎?

并不會有變化!


原因是因為,培養(yǎng)基中會加入酸堿指示劑,例如酚紅,用于檢測培養(yǎng)基的酸堿性。當培養(yǎng)基酸性增加時,酚紅會呈現(xiàn)黃色,當培養(yǎng)基堿性增加時,酚紅會呈現(xiàn)紅色。


在細胞培養(yǎng)過程中,細胞代謝會產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物,使培養(yǎng)基酸性增加,因此培養(yǎng)基會逐漸變黃。當培養(yǎng)基解凍后,酸性代謝產(chǎn)物逐漸消耗,培養(yǎng)基的酸性減少,導致酚紅顏色逐漸變回紅色。


如果凍結的液體是水或緩沖液,一般不會出現(xiàn)顏色的變化。這是因為水和緩沖液不含有酸堿指示劑,所以當其凍結和解凍時,顏色不會發(fā)生變化。


2

為什么細胞培養(yǎng)基冷凍以后,會變酸呢?


細胞培養(yǎng)基凍結后變酸的原因是由于冰凍過程中,液體中的二氧化碳和其他氣體會逸出。冰結過程中,水分子會有序排列形成晶體,氣體無法溶解在冰中,因此逸出。培養(yǎng)基中二氧化碳的減少會導致酸堿度的變化,使培養(yǎng)基變酸,從而導致培養(yǎng)基的顏色變黃。


3


培養(yǎng)箱的CO2濃度為什么要設置5%?


培養(yǎng)箱的CO2濃度設置為5%是為了模擬細胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境,并提供適合細胞體外培養(yǎng)的條件。培養(yǎng)箱要求穩(wěn)定的溫度、CO2水平、酸堿度和濕度,其中CO2濃度的穩(wěn)定性對細胞培養(yǎng)非常重要。


以常用的細胞培養(yǎng)基DMEM為例,其碳酸氫鈉濃度為1.5g/L。廠家已經(jīng)測試好對應的培養(yǎng)箱濃度在5%左右,假如該培養(yǎng)基碳酸氫鈉濃度變?yōu)?g/L,則培養(yǎng)箱CO2濃度應維持在10%。


國外常用的培養(yǎng)條件就是,1升培養(yǎng)基里含3克NaCO3,CO2培養(yǎng)箱的濃度是10%。而國內(nèi)大多數(shù)是5%的濃度,相對應的培養(yǎng)基內(nèi)碳酸氫鈉濃度就在1.5g/L左右。



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